Protocolos y recomendaciones de desvitrificación de óvulos

Se trata de una técnica rápida, optimizada y sencilla. El éxito del procedimiento reside en el seguimiento estricto del protocolo, sobre todo en aquellos puntos críticos para la supervivencia de los ovocitos.
En el protocolo de desvitrificación de KITAZATO THAWING MEDIA VT 802 (ref.91182) –OPEN SYSTEM, encontraréis todo el procedimiento en un exhaustivo paso a paso.

Para optimizar el proceso y conseguir mejores resultados de descongelación, el equipo de embriólogos de OXX bank pone a vuestra disposición indicaciones y consejos para superar con éxito los diferentes puntos críticos de la técnica.

  • El cryotop SIEMPRE tiene que estar sumergido en Nitrógeno líquido. Atención con el paso del tanque al cooling rack, y durante la retirada del capuchón de la pajuela cryotop.
  • Calentar por separado, el tubo de medio TS y la placa de en el incubador >2 horas (idealmente toda la noche).
  • Atemperar DS y WS a 25-27°C (temperatura ambiente) durante 1 hora.
  • Es muy importante que el choque térmico en TS se produzca a 37°C (¡nunca menos!). Imprescindible realizar control de temperatura del medio para asegurar la temperatura óptima en el momento de sumergir el cryotop en TS.

Atención a:

  • La temperatura disminuye rápidamente al levantar la tapa de la placa de Petri. Tenerlo en cuenta a la hora del control de temperatura (37°C tiene que ser la temperatura real del medio de la placa fuera del incubador y una vez levantada la tapa). Levantarla en el mismo momento de sumergir la pajuela.
  • Inmersión rapidísima, inmediata, del cryotop en TS (37°C), en < 1 segundo. Debido al poco volumen de medio de carga del cryotop, si el tiempo es superior a 1 segundo, la velocidad de calentamiento no es suficientemente alta para una supervivencia adecuada.
  • Durante el primer minuto en TS el ovocito debe desprenderse por sí mismo de la pajuela cryotop. Transcurrido 1 minuto tenemos diferentes estrategias para conseguirlo (en este orden):
    1. Frotar la pajuela cryotop contra el fondo de la placa de petri (por el lado donde no está el ovocito) hasta que el ovocito se suelte de la pajuela.
    2. Verter medio sobre el ovocito mediante pipeta (stripper), pero sin tocarlo con la punta del capilar.
    3. Con el capilar, tirar suavemente del lateral de la hoja del cryotop haciendo que esta vibre y libere el ovocito.
  • Los ovocitos son extremadamente sensibles durante el proceso y por lo tanto:
    • Manipularlos lo mínimo e indispensable, y siempre con mucho cuidado.
    • Utilizar capilares de diámetro suficiente para minimizar el daño potencial en el ovocito (superior a 170μm)
  • Incubar los ovocitos a 37°C durante 2 horas antes del ICSI.

Preparación y realización

Trucos y consejos

Información de interés

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